细辛挥发油抗过敏性鼻炎有效成分及靶点预测的研究

目的:采用血清药物化学-血清药理学与网络药理学方法,预测细辛挥发油抗过敏性鼻炎的有效成分及潜在靶点。方法:36只Wistar大鼠随机分为空白组、细辛挥发油0.5,1 h组(3 g·kg~(-1)生药量)、盐酸西替利嗪片1 h组(10 mg·kg~(-1))、醋酸泼尼松片1 h组(12 mg·kg~(-1))和辛芩颗粒1 h组(15 g·kg~(-1)),每组6只。灌胃后腹主动脉采血,血样3 000 r·min~(-1)离心10 min,无菌分离血清,-20℃冷冻保存。酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定各时间点含药血清(血清容积10%)对抗原刺激1.5 h后大鼠嗜碱性细胞白血病细胞株(RBL-2H3)细胞(细胞密度2.5×105/m L)释放组胺、氨基己糖苷酶的影响(n=6);采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术检测各时间点含药血清中的成分,比较细辛挥发油、灌胃0.5,1 h后含药血清和空白血清的色谱图,寻找细辛挥发油的移行成分;对移行成分进行靶点预测,构建和分析其"成分-靶点"网络。结果:与空白血清组相比,细辛挥发油0.5,1 h含药血清组均能抑制抗原诱导RBL-2H3肥大细胞释放组胺和脱颗粒(P0.05)。含药血清中检测到12个移行成分,分别为α-蒎烯,莰烯,2-β-蒎烯,δ-3-蒈烯,柠檬油精,1,8-桉叶素,优香芹酮,龙脑,3,5-二甲氧基甲苯,黄樟脑,甲基丁香酚,2,3,5-三甲氧基甲苯,它们可能通过调控环氧合酶-2,毒蕈碱乙酰胆碱受体M3,alpha 1肾上腺素能受体,一氧化氮合酶等靶点发挥抗过敏性鼻炎的作用。结论:该方法初步揭示细辛挥发油抗过敏性鼻炎的有效成分及其潜在靶点。     

知母药材的HPLC/PDA/ELSD指纹图谱研究

[目的]建立知母药材的高效液相色谱仪-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器联用(HPLC/PDA/ELSD)指纹图谱。[方法]采用Waters Symmetry Shield TM RP C18(5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%冰醋酸,梯度洗脱流速1.0 m L/min,柱温30℃,检测波长258 nm,ELSD检测器载气气压30 Psi,漂移管温度80℃。[结果]建立了知母的HPLC/PDA/ELSD指纹图谱,在HPLC-PDA色谱图中标定了17个共有峰,HPLC-ELSD色谱图中标定了14个共有峰。[结论]该方法重复性好,可用于知母药材的全面质量控制。     

Box-Behnken设计-效应面法优化黄连多糖的提取工艺

目的：本研究旨在优选黄连中黄连多糖的提取工艺条件。方法：采用Box-Behnken设计-效应面法,以黄连出膏率、多糖得率和糖醛酸得率为评价指标,考察黄连多糖回流提取过程的提取温度、提取次数、提取时间和料液比对提取工艺的影响。结果：最终确定黄连多糖的最佳提取条件为：提取温度100℃,提取时间3.8 h,提取次数3次,料液比 1?15.7。结论：运用Box-Behnken设计-效应面法优化黄连多糖的提取方法是准确、合理、可行的。     

薯蓣皂苷元对昆明鼠的亚慢性毒性实验

目的：评估薯蓣皂苷元对小鼠的亚慢性毒性作用。方法：采用随机数字表法将80只小鼠分为0（对照）、100、200、400 mg·kg^-1共4组,每天灌胃1次,连续给药90天,评估薯蓣皂苷元对小鼠的亚慢性毒性作用。观察指标包括小鼠体质量、毛色、饮食、粪便情况等,检测指标包括血常规分析、血液生化检查和病理学检查。结果：与对照组相比,雄性药物组小鼠体质量略减轻。血液学和病理学检查并无明显异常。结论：薯蓣皂苷元亚慢性毒性无可见不良效应剂量水平大于400 mg·kg^-1,口服给药较为安全。     

重楼活性单体PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨重楼活性单体PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响及其联合5-氟尿嘧啶(5-FU)和洛铂的抗肿瘤效果。方法 采用噻唑蓝(MTT)法和克隆形成抑制实验观察不同浓度PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用;分别观察PP-22联合5-FU和洛铂对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用;碘化丙锭单染流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡水平;Western blot法检测PP-22作用后细胞凋亡相关蛋白的表达。结果 重楼单体PP-22能显著抑制SW620细胞的生长,作用呈剂量-效应关系;随着PP-22浓度的增加,细胞克隆形成逐渐减少,与细胞对照组和DMSO组相比有显著差异;PP-22联合不同浓度的5-FU和洛铂作用于SW620细胞48 h,可提高SW620细胞对5-FU和洛铂的敏感性;不同浓度PP-22作用于SW620细胞后,细胞周期阻滞于S期;PP-22作用后存在Caspase-3和Caspase-9蛋白的活化和降解,抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL减少,促凋亡蛋白Bax的表达增加。结论 PP-22能显著抑制人结肠癌SW620细胞增殖,诱导细胞凋亡,提高SW620细胞对5-FU和洛铂的敏感性。     

基于电子鼻技术的多基原莪术鉴定?

目的：建立基于电子鼻技术的多基原莪术的鉴定方法。方法以检测器响应值为评价指标,优化样品的检测参数和筛选金属传感器,应用主成分分析和辨别因子分析对特征数据进行多元统计学分析。结果建立了多基原莪术的电子鼻检测法,得到其气味识别指纹图谱。结论基于电子鼻技术的多基原莪术鉴定方法可行,为中药材和中成药的鉴定提供了新思路。     

川芎提取物等口服吸收促进剂对白芷在大鼠肠道吸收的作用

目的 考察川芎提取物及吸收促进剂对欧前胡素和异欧前胡素在大鼠结肠吸收过程的影响,比较川芎提取物与其他4种吸收促进剂的促吸收作用.方法 利用大鼠在体单向肠灌流模型,采用HPLC法测定欧前胡素和异欧前胡素质量分数,分别考察癸酸钠、泊洛沙姆、羟丙基-β-环糊精、去氧胆酸钠和川芎提取物对目标化合物吸收的促进作用.结果 质量分数1.5％川芎提取物和1.0％癸酸钠能显著提高欧前胡素的肠道吸收速率,最高促渗比分别为8.8和8.0;其次为质量分数0.2％去氧胆酸钠、5.0％泊洛沙姆和5.0％HP-β-环糊精,最高促渗比分别为7.7、4.7和3.6.各种吸收促进剂对异欧前胡素在肠道的吸收均有一定影响,但与欧前胡素并不同步.结论 川芎提取物和癸酸钠可作为欧前胡素口服制剂的吸收促进剂使用,中药川芎配伍白芷使用是合理有效的.     

丹参川芎联合骨瓜或骨肽对糖尿病骨质疏松患者糖代谢和骨代谢的影响

目的:探讨在丹参川芎治疗基础上,结合骨瓜或骨肽应用于糖尿病骨质疏松症对糖代谢、骨代谢作用价值。方法:选取2016年3月至2017年9月湖北省黄石市第二医院受诊的糖尿病骨质疏松症患者253例作为研究对象。将应用丹参川芎结合骨瓜治疗的128例归为骨瓜组,将予以丹参川芎结合骨肽治疗的125例归为骨肽组,分析2组糖化血红蛋白(Hb A1c)、空腹血糖(FBG) N-端中段骨钙素(N-MID-OT)、骨特异性碱性磷酸酶(BAP),骨形态发生蛋白-2(BMP-2),骨钙素(BBGP)。骨密度(BMD),甲状旁腺素(PTH)、碱性磷酸酶(ALP),β-胶原特殊序列(β-CTx),并比较药物安全性。结果:1)骨瓜组糖代谢Hb A1c(7. 41±0. 64)%、钙离子(2. 21±0. 28) mmol/L、FBG(6. 12±0. 59) mmol/L、血磷(1. 42±0. 25)mmol/L在治疗后与骨肽组Hb A1c(7. 79±0. 51)%、钙离子(2. 27±0. 33) mmol/L、FBG(6. 37±0. 83) mmol/L、血磷(1. 35±0. 31) mmol/L差异无统计学意义(P 0. 05); 2)骨肽组N-MID-OT(16. 37±2. 83) ng/m L和骨瓜组差异无统计学意义(P0. 05),BAP(142. 26±10. 66)μg/L、BGP(5. 07±1. 32)μg/L显著低于骨瓜组,BMP-2 (86. 35±6. 24) ng/L显著高于骨瓜组,差异有统计学意义(P 0. 05); 3)骨肽组BMD(0. 57±0. 13) g/cm3显著高于骨瓜组,PTH(32. 26±2. 15) pg/m L、ALP(72. 35±5. 19) U/L显著低于骨瓜组,差异有统计学意义(P 0. 05),β-CTx(0. 39±0. 02) ng/m L和骨瓜组(0. 42±0. 04)ng/m L差异无统计学意义著(P 0. 05); 4)骨瓜组不良反应率(3. 13%)显著低于骨肽组(9. 60%),差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:对于糖尿病骨质疏松症的治疗,基于丹参川芎,增加注射用骨肽比较注射用骨瓜提取物,更能促进患者多项骨代谢指标、血清生化指标及BMD的恢复,二者具有相似的调节糖代谢的作用,但骨肽不良反应相对较高,临床上应结合患者实际情况进行药物的选择。     

基于UPLC-PDA生物碱指标性成分含量合特征图谱的不同产区黄连（味连）整体质量表征研究＊

目的 通过对不同产地黄连（味连）药材质量进行分析，得到黄连药材质量差异表征。方法 采用UPLC-PDA色谱法，建立黄连生物碱指标性成分含量合特征图谱分析方法，采用PLS-DA模型分析，找到不同产区黄连药材质量差异表征。结果 不同产区黄连药材特征图谱色谱峰数量和成分类型一致，以生物碱类成分和非生物碱类成分相对含量同时考量可将黄连药材分为3类：第1级黄连药材主要来源于四川、重庆产区，生物碱和非生物碱类成分含量均较高，9（酚类）号色谱峰成分相对含量为主要相关成分；第2级黄连药材主要来源于四川、重庆产区，生物碱和酚类成分含量较高，1（未知）、13（黄连碱）、2（酚类）、5（其他）、12（生物碱）号色谱峰成分相对含量为主要相关成分；第3级黄连药材主要来源于湖北、重庆、四川产区，生物碱和非生物碱含量较低，11（生物碱）、6（酚类）、8（未知）号色谱峰成分相对含量为主要相关成分。结论 不同产区黄连药材质量差异表征为：四川产黄连药材主要表现为生物碱类成分、其他类成分含量较高，与其他产区黄连差异较大；重庆产黄连主要表现为酚类成分含量较高；湖北产区黄连与重庆产区黄连相似。     

基于斑马鱼模型三棱抗血栓活性部位筛选及其化学成分研究

目的：筛选中药三棱抗血栓活性部位并对其化学成分进行研究。方法：采用斑马鱼血栓模型对中药三棱80%乙醇提取物的石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位的抗血栓作用进行测试。以硅胶柱色谱等方法对抗血栓作用显著的部位进行分离纯化，通过NMR，MS等方法并结合文献数据鉴定化合物结构。结果：乙酸乙酯萃取物能显著增加斑马鱼血栓模型的心脏染色强度（P<0.01），其余各部位抗血栓作用不明显。在该部位分离得到11个化合物，分别鉴定为对羟基苯甲酸（1）、5-羟甲基糠醛（2）、对甲氧基苯甲醛（3）、对羟基苯甲醛（4）、对香豆酸（5）、阿魏酸（6）、香草酸（7）、原儿茶酸（8）、香兰素（9）、Methyl-3，6-dihydroxy-2-[2-（2-hydroxyphenyl）-ethynyl]benzoate （10）及1，3-O-二阿魏酰基甘油（11）。结论：三棱提取物的乙酸乙酯萃取部位具有显著的抗血栓作用，其主要化学成分为酚酸类化合物。